Prueba PCR para la Ascariasis

Tema: PCR cuantitativa (qPCR) y PCR digital (dPCR) para la detección de huevos de Ascaris lumbricoides en agua recuperada

Objetivo: Detectar la cantidad de huevos de A. lumbricoides en agua recuperada mediante el uso de qPCR y dPCR para determinar si es factible la reutilización del agua y evitar los riesgos de infección humana

Muestra: Agua dulce, suelo y aguas residuales

Ácido Nucleico a ser extraído: ADN genómico bacteriano

Gen o Secuencia a amplificar: Los cebadores específicos fueron Alum96F y Alum183R, que amplificaron el fragmento de 89 pb de la secuencia de ITS-1

PCR: 

qPCR (PCR cuantitativa)

95°C - 10 minutos

95°C - 10 segundos         (40 ciclos)

60°C - 40 segundos

dPCR (PCR digital)

95°C - 10 minutos

60°C - 2 minutos           (40 ciclos)

98°C - 30 segundos

72°C - 2 minutos

Sensibilidad y Especificidad Analítica:

Visualización: Electroforesis

Referencias bibliográficas

1. Acosta L, Trinidad AB, Bornay FJ, et al. Quantitative PCR and Digital PCR for Detection of Ascaris lumbricoides Eggs in Reclaimed Water. BioMed Research International [Internet]. 2017 [citado 2021 Jul 9];2017:1–9. Disponible en: https://doi.org/10.1155/2017/7515409